
斑馬魚模型良好的生物學特性使其很適合高通量和高內(nèi)涵藥物篩選, 是傳統(tǒng)藥物開發(fā)模式的重要補充。利用斑馬魚快速篩選候選藥物的活性和副作用,可以在藥物開發(fā)的極早期降低開發(fā)風險,大幅節(jié)省成本,縮短藥物開發(fā)周期,提高成功率。
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1、Q:請教老師,我設計的sgRNA?與非靶序列相似度多大時會把這個非靶標基因也編輯了?是否可以理解為:在遠離pam端有4個及以內(nèi)的與靶序列不同堿基的序列都是可以被編輯的。即脫靶到了那些序列。A:有脫靶機會,但通常識別活性會比較低,一般地,脫靶是需要盡量避免的。如果想要敲除兩個以上基因,需要針對要敲除的基因分別設計crispr以制備不同的sgRNA。?2.Q:crispr/Cas13在gRNA設計
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基因編輯質(zhì)粒的相關問題討論-南京堯順禹斑馬魚基因編輯
基于基因編輯質(zhì)粒的相關問題討論1、Q:利用crsipr敲除,可以用瞬轉(zhuǎn)質(zhì)粒嘛?A:可以!這樣做得到的細胞是mosaic,即有的細胞是基因組編輯了,有的則沒有;有的細胞基因敲除了,有點則沒有。如果只要改變部分細胞基因即可的話,則可以通過瞬轉(zhuǎn),如以原代細胞為研究對象。?2、Q:保存領到的質(zhì)粒和菌液,說明書上說質(zhì)粒保存溫度-20℃/-80℃,怎么決定?我把領到的裝質(zhì)粒和菌液的離心管插到一個管插上直接放進
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